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关于植物激素脱落酸ELISA试剂盒实验
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| 编辑：
时间：
2012-05-22
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www.xinlebio.com |
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温馨提示：本植物激素脱落酸（ABA）ELISA试剂盒仅供体外研究使用，不可用于临床诊断。
操作步骤
实验开始前，各ELISA试剂盒均应平衡至室温，试剂不能直接在37 溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加标准品或待测样品100 ，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37 温育2小时。为保证实验结果有效
性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2、 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100 (临用前配制)，酶标板加上覆膜，37 温育1小时。
3、 弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约400 /每孔，甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4、 每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100 ，加上覆膜，37 温育1小时。
5、 弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6、 每孔加底物溶液90 ，酶标板加上覆膜37 避光显色(反应时间控制在15-30分钟，当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止)。
7、 每孔加终止溶液50 ，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物 液的加入顺序相同。ELISA试剂盒
8、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度( 值)。
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