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ELISA试剂盒的双抗体夹心法
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时间:
2012-09-19
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ELISA试剂盒的双抗体夹心法
在ELISA试剂盒一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过证抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成“夹心复合物”。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同, 如按常法测读,所得结果将低于实陡的含景,这种现象被称为钩状效应,因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增髙的物质时,应注意可测范围的最高值。用髙亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。 ELISA试剂盒双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,伹不适用于测定半抗原及小分子单价抗,因其不能形成两位点夹心。
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