ELISA试剂盒间接法測抗体

    ELISA试剂盒间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用海袪记的抗抗体，抗人免疫球蛋白抗体，以检测巳与固相杭原结合的受拾抗体，故称为间接法、操作步骤如下：
    1.将特异性抗原与固相栽体联结，形成闹相抗原。洗除去未结合的抗原及杂质。
    2.加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清中的其他成份在洗涤过程由被洗去。
    3.加酶标抗抗体。可用酶标抗人lg以检測总抗体，一般多用酶标抗人igg检测抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶景与标本中受检抗体的量正相关。
    4.加底物显色。
    ELISA试剂盒的本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。ELISA试剂盒间接法的优点是只要变换包被抗原，就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。
    ELISA试剂盒间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提杭原包被也能取得实际有效的结果，但应尽可能予以纯化，以提髙试验的特异性。特别应注惫除去能与一般健康人血清发生反应的杂质，例如以ecoli为工程菌的重组抗原，如其中含有ecoli成份，很可能与受过e.coli感染者血淸中的抗e.coli抗体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人lg反应的物质，例如来自人血浆或人体组织的抗原，如不将其中的去除，试验中也将发生假阳性反应。另外如抗原中含有无关蛋白，也会因竞争吸附而影响包被效果。
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