酶标记elisa试剂盒
产品特点:
戊二醛法标记繁琐,标记产物不均一,标记率低,反应条件不易控制,聚合体较多易产生空间位阻从而导致抗原抗体失活,造成大量的抗原抗体浪费。过碘酸钠法(或高碘酸钠法)同样是操作繁琐,条件较为强烈,易导致抗原抗体失活,标记率低,多聚体较多,且本底高。
本酶标记试剂盒采用独特的偶联剂,可以用来标记抗原或抗体,标记方法简便快速,抗原抗体用量少,标记周期短,标记全过程仅需2个小时;标记产物均一,多聚体少,从而最大程度保持抗原抗体的活性;标记完后无需透析即时使用,标记率高,可大于95%;本底低;试剂内含有辣根过氧化物酶和抗原抗体的稳定剂,标记同时并对抗原、抗体及酶进行稳定化处理。
适用范围:适用于辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)、β半乳糖苷酶以及亲和素的标记
包装规格:5mg ×10 168元
5mg ×20 258元
5mg ×50 568元
试剂组成:
REAGENT Ⅰ 抗原、抗体、HRP等标记酶的缓冲溶液
REAGENT Ⅱ 偶联剂溶媒
REAGENT Ⅲ 偶联剂(5mg/份)
REAGENT Ⅳ 终止液
操作步骤(以HRP为例):
1. 称取5mg HRP;按照抗原与HRP摩尔比为1:1,抗体与HRP摩尔比为1:3来准备抗原或抗体;将二者混合,然后加入REAGENTⅠ 300 μl,充分溶解,混匀。
2. 取一份REAGENT Ⅲ(偶联剂),加入50 μl REGENT Ⅱ,充分溶解混匀。
3. 将第1步的酶与抗原(或抗体)混合液和第2步的偶联剂溶液混合,混匀,4℃冰箱过夜或室温放置2~4小时(4℃过夜的标记率较高)。
4. 加入REAGENT Ⅳ 100 μl,混匀、放置一小时,终止反应。
5. 2000 rpm/min离心5分钟,取上清。为了避免材料损失,可以向沉淀中再加入1ml REAGENT Ⅰ,重悬沉淀,离心,取上清。合并两次上清液,即为酶标物。
6. 酶标物加50%甘油(或BSA)及防腐剂,4℃保存备用。
注:如果抗原(或抗体)为溶液状态,按比例加入HRP溶解混匀后,以1M盐酸或碳酸钠溶液调pH值为7.5~8.0,然后按步骤2,3,4,5,6操作。
注意事项:
1. 抗原抗体如果是存在于硫酸铵、甘氨酸或Tris缓冲液中,需以PBS(pH 7.6)缓冲液充分透析,也可以超滤离心管进行超滤,以除去过多盐类。
2. 务必在抗原(或抗体)和所标记的酶充分溶解混匀后再加偶联剂。
3. REAGENT Ⅲ偶联剂于-20℃保存,其他试剂4℃保存。
4.本试剂仅用于科学研究,体外诊断试剂;禁用于其他用途,如食品、化妆品、药品等等
保质期:一年(见瓶签)