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兔血纤蛋白原降解产物ELISA试剂盒组成
编辑: www.xinlebio.com       时间: 2012-08-13       http:// www.xinlebio.com

兔血纤蛋白原降解产物ELISA试剂盒组成
  1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
  2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(160pmol/L) 0.5ml×1瓶
  3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
  4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
  5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
  6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
  标本要求
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  兔血纤蛋白原降解产物ELISA试剂盒操作步骤
  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  80pmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
  40pmol/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
  20pmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
  10pmol/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
  5pmol/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
  
  
  2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7. 温育:操作同3。
  8. 洗涤:操作同5。
  9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

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